Real-Time- / qPCR-Basiskurs

Praxiskurs in Bremen

Real-Time- / qPCR-Basiskurs

Einleitung

Die Real Time PCR oder quntitative PCR (qPCR) hat sich als mittlerweile als unersetzliche Standard-Methode für den Nachweis, die Quantifizierung und auch Genotypisierung von DNA/RNA etabliert. Sie ist schnell, präzise und erlaubt hohen Durchsatz.

Lernziele und Inhalte

In diesem Kurs lernen sie alles, was sie für eine erfolgreiche qPCR Durchführung und Auswertung brauchen.
Neben den theoretischen Grundlagen der qPCR, dem allgemeinen Versuchsaufbau und der Auswertung und Interpretation der erzielten Daten, stehen im Kurs drei Experimente modelhaft im Zentrum:
die Bestimmung der Nachweis-und Quantifizierungsgrenze (LoQ, LoD), die Genotypisierung mittels HRM und Sonden sowie die relative Quantifizierung in einer Expressionsstudie und ihre Auswertung.  

Theorie-Teil

• Prinzip der Real-Time PCR

• Unterschiedliche Detektionsformate

• Geräteplattformen (Eva-Green, Sonden, Multikanal-Detektion mit/ohne ROX

• Interpretation und Daten-Auswertung: Ct-Werte, Threshold-Setting, Baseline, Schmelzkurve, Methoden der Effizienz-Bestimmung und Rechnen mit Delta CT

• Genotypisierung mittels HRM und Sonden-Systemen (TaqMan)

• Qualifizierung der RNA und cDNA

• Primer- und Sonden-Design

• Analyse der geeigneten endogenen Referenz und verschiedene Auswertemethoden

• Troubleshooting: Integrität der RNA/cDNA, Kontamination, Diskussion: Anzahl und Grüßer der Replikate

Praxis-Teil

• Nachweis und Quantifizierung von Legionellen mittels Standardkurve (LOD, LOQ)

• Genotypisierung über HRM und Sonden-Systemen (Sexing)

• Heat-Shock-Expressionsstudie

• Präparation von RNA, cDNA-Synthese, QC, absolute und relative Quantifizierung

• Mit den Kursdaten werden verschiedene Auswertungsmethoden demonstriert

Termin und Preis - Kurs in Bremen

Anmeldung und weitere Kurse bei unserem Partner e-learning4science

Schulungshort: Bremen, OLS - OMNI Life Science Schulungslabor

Karl-Ferdinand-Braun-Straße 2, 28357 Bremen, Deutschland

Termin 2023: Di, 05. September bis Do. 07. September

Dauer: 3 Tage

Preis 990 Euro zzgl. MwSt. (1178,10 inkl. MwSt.)

Kurssprache: Deutsch